日本三重大学ToshiyoshiAraki团队在国际期刊《MarineBiotechnology》上在线发表了题为“CellWallRegenerationinBangiaatropurpurea(Rhodophyta)ProtoplastsObservedUsingaMannan-SpecificCarbohydrate-BindingModule”的研究论文。
暗紫红毛菜的细胞壁含有的三种特殊的多糖（β-1,4-甘露聚糖，β-1,3-木聚糖和紫菜多糖）。该研究利用碳水化合物结合结构域（CBM）与绿色荧光蛋白融合表达构建荧光探针，利用其实现了暗紫红毛菜原生质体的细胞壁再生过程中的β-甘露聚糖的原位可视化观察。首先将来自弧菌菌株MA-的β-1，4-甘露聚糖酶中特异性结合甘露聚糖的CBM27与绿色荧光蛋白融合的蛋白（GFP-CBM27）在大肠杆菌中表达。亲和电泳结果显示GFP-CBM27具有与可溶性β-甘露聚糖结合能力，而普通GFP不能结合β-甘露聚糖。随后利用三种酶从暗紫红毛菜叶状体中分离得到原生质体。利用GFP-CBM27对不同生长阶段的原生质体进行了原位染色观察。结果表明培养12h后部分原生质体细胞表面的局部区域开始产生β-甘露聚糖。随着培养时间的延长，β-甘露聚糖散布在整个细胞表面。随着时间的推移（12、24、36、48、60h），原生质体中β-甘露聚糖含量逐渐增多。尽管GFP-CBM27在最初生长阶段就能与其细胞结合，但它是否与成熟叶状体结合尚未明确。该研究首次利用利用荧光标记的CBM实现了红藻细胞壁再生过程中β-甘露聚糖的原位可视化。
参考文献
UmemotoY,ArakiT.CellWallRegenerationinBangiaatropurpurea(Rhodophyta)ProtoplastsObservedUsingaMannan-SpecificCarbohydrate-BindingModule[J].MARINEBIOTECHNOLOGY,,1:24-31.
图文：韩瑾
编辑：韩瑾
审核：梅轩玮
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