第三节:曲霉菌抗体测定
1曲霉菌抗体检测临床意义?
曲霉抗体的研究没有念珠菌抗体那么广泛和深入。Latgé等研究小组报道,约1/2的IA患者产生曲霉特异性抗体。Sambatakou等进一步证明,抗体测定对非中性粒细胞减少的亚急性侵袭性曲霉病(invasiveaspergillosis,IA)患者是最好的无创诊断方法。KappeR等研究发现,总体大约23%的侵袭性曲霉感染患者曲霉抗体检测呈阳性,免疫力低下的病人在用药有效后10.8天左右能检测到抗体产生。抗体检测尤其是ELISA法IgG抗体检测对临床诊断的确认和临床用药的评价有着十分重要的意义。
2商品化的曲霉菌抗体检测试剂盒有哪些?
商品化的曲霉菌抗体检测试剂盒,国外产品有伯乐(Bio-Rad)公司生产的Platelia?AspergullusIgG抗体检测试剂盒,德国VirionSerion公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒,美国IBL公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒;国内产品有天津贻诺琦(Bio-Enoche)生物工程有限公司(中美合资)生产的曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒(ELISA)。
3曲霉菌抗体检测试剂盒原理?
曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒(ELISA)原理相同,均采用ELISA间接法。将预处理后的患者血清(或血浆)样本加到包被有曲霉菌抗原的酶标板中,血清(或血浆)中的曲霉菌IgM或IgG抗体与固相抗原结合,再加入抗人IgM酶标抗体或抗人IgG酶标抗体,形成抗原-抗体-酶标抗体复合物,最后加四甲基联苯胺(TMB)底物产生显色反应,用酶标仪在nm波长下测定其吸光度,吸光度值与待测物浓度成正比,通过标准曲线对样本中曲霉菌IgM或IgG抗体浓度进行定量分析。
4国产曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒性能指标?
上述国产曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒分析灵敏度分别为8AU/mL、31.25AU/mL;特异性均大于90%;测范围分别为8~64AU/mL、31.25~AU/mL;与德国VirionSerion公司IgM抗体检测试剂盒总体符合率为96.8%(31例对比)。
5曲霉菌IgM抗体检测为什么样本需要预处理?
样本处理的目的是去除类风湿因子的干扰。类风湿因子是一种以变性IgG为抗原的自身抗体,主要为IgM型。进行IgM抗体检测时,它的存在会导致假阳性结果。此外,结合力强的病原体特异性IgG抗体也可能取代结合力弱的病原体特异性IgM抗体与抗原结合,造成IgM检测假阴性结果的出现。因此,进行曲霉菌IgM抗体检测前需用类风湿因子吸附剂吸附掉血清中可能存在的类风湿因子。
6为什么曲霉菌IgM、IgG抗体检测浓度单位是AU/ml?
目前,尚无曲霉菌IgM和IgG的国际标准品和国家标准品,根据年国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)和国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)推荐的“临床实验室物质特性和单位命名规则”(PropertiesAndUnitsInTheClinicLaboratorySciencesI.SyntaxAndSemanticRules),使用AU/ml(arbitraryunit)作为浓度单位(该单位不是国际统一单位)。
7开展曲霉抗体检测需用什么仪器设备?
需要使用的仪器包括:酶标仪(nm)、恒温箱(37℃)、离心机、混旋器等。
8曲霉菌抗原抗体联合检测方案是什么?
可参考如下方案
往期链接:深部真菌感染的实验室诊断1-3-β-D-葡聚糖测定深部真菌感染的实验室诊断
1-3-β-D-葡聚糖测定(二)深部真菌感染的实验室诊断
1-3-β-D-葡聚糖测定(三)深部真菌感染的实验室诊断
念珠菌抗原测定深部真菌感染的实验室诊断
念珠菌抗体测定深部真菌感染的实验室诊断
念珠菌抗体测定(二)深部真菌感染的实验室诊断
曲霉菌抗原测定深部真菌感染的实验室诊断
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